[討論] 蛋白質定量

看板Biotech作者 (熱騰騰的泡麵)時間14年前 (2011/08/31 18:14), 編輯推噓3(306)
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最近小弟在用類似Bradford method進行protein 定量 是利用試劑在偏鹼性環境下解離帶負電荷 與帶正電的基團如 lysine histidine結合後形成偏綠色產物 測UV660 目前碰到的問題是 假如蛋白質denature變成一級結構或是分解成氨基酸後 喪失了三級或是四級結構 那麼利用bradford 還是可以有相同的定量結果嗎? 亦或是bradford必須要在蛋白質構型完整情況下才能與之結合產生穩定產物呢? 如果知道可否為小弟解惑 感激不盡! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.60.122.10

08/31 19:06, , 1F
還是可以有相同的定量結果
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08/31 19:07, , 2F
實驗室就是以TCA(強酸)沉澱蛋白質後再定量
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08/31 19:32, , 3F
TCA後很難回溶吧
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08/31 21:32, , 4F
所以假如要分辨是否分解有沒有專一性的測定方法呢
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09/01 13:52, , 5F
那不就是要測活性了嗎?
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09/01 16:36, , 6F
C大~ 我們沉澱完會再用0.1N NaOH回溶 再定量 感覺還ok
09/01 16:36, 6F

09/01 22:21, , 7F
如果是我會用巴斯德滅菌混搭間歇滅菌試看看
09/01 22:21, 7F

09/01 22:23, , 8F
或著丟到鈷六十小房間去....
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09/01 22:24, , 9F
回錯文請無視..XD
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