[求救] 抽pancreas的RNA

看板Biotech作者 (勇伯)時間14年前 (2011/08/30 13:27), 編輯推噓3(3推 0噓 6→)
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想請教學長姐們，有沒有人抽過mouse pancreas的RNA？ 可以給我一些建議 我們家使用的方法是將pancreas tissue取下來之後 分別浸泡在RNA later中，以及放入液態氮保存 之後再利用TRIzol以及Geneaid的Kit去抽RNA 兩種保存方法的tissue我都有拿來做實驗 抽完的RNA經由nanodrop測出來的濃度也都還不錯( > 1μg/μl) 260/280的值也都在 2 左右 但是經過跑膠確認後卻發現RNA都degrade 而作為postive control的liver RNA可以清楚的看到28S、18S的band 所以想請教有經驗的學長姐，看看有沒有什麼方法可以改善抽出來的quality -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.253.121
推
08/31 19:09, , 1F
tissue取下後立刻丟進液態氮, 等完全結凍之後再丟到epp保存
08/31 19:09, 1F
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08/31 19:10, , 2F
我試過放-80兩個星期之後再拿出來抽, 也還不會DEGRADE
08/31 19:10, 2F
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08/31 19:11, , 3F
還有一個重點是, pancreas只要取一點點出來抽, 就可以得到
08/31 19:11, 3F
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08/31 19:12, , 4F
足夠的RNA(我的比例是30ug+1ml Trizol)
08/31 19:12, 4F
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08/31 19:13, , 5F
當TRIZOL比例相對少的時候,可能就沒辦法完全抑制掉pancreas
08/31 19:13, 5F
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08/31 19:14, , 6F
內所含的酵素
08/31 19:14, 6F
推
08/31 19:19, , 7F
講錯了 是30mg + 1ml Trizol, 不是ug
08/31 19:19, 7F
推
09/01 22:21, , 8F
你也可以先將tissue跟TRI加好均質再拿去冰 小的tissue我會
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09/01 22:21, , 9F
這麼做
09/01 22:21, 9F
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