[求救] 大鼠肝臟的CPT1-L的western blot
大家好
現在我用WB要看大鼠肝臟CPT1-L(Carnitine palmitoyltransferase1)的蛋白質表現
買的是Santa Cruz的CPTI-L (H-95): sc-20669
抗原濃度從未稀釋到4倍稀釋，抗體濃度從200倍、500倍、1000倍、5000倍、1萬倍都看了
但卻怎麼都試不出很好的結果 >"<
datasheet上寫該蛋白質在肝臟表現是90~94kDa，肌肉組織則是75kDa
但我看的到的結果反而是75左右的地方表現比較強烈。
左邊是肝臟未稀釋抗體500倍，右邊是脂肪組織的對比(75的地方)。
http://ppt.cc/4U2f
肝在100下一點點好像有，但很不清楚，反倒是75的地方比較明顯？
這是肝臟抗體5000倍。
http://ppt.cc/_Af1
100下一點好像有一條band？不曉得是不是…
抗原4倍稀釋後的更不清楚。
我同個組織看其他蛋白質都沒有問題(FAS、ACC、AMPK及其磷酸化蛋白質等，都是4倍稀釋)
所以試藥應該是沒問題才是。
就CPT1-L怎麼試都試不好。
●有可能是抗體本身不好嗎？？●
不曉得有沒有人可以給我指點一下迷津的，感謝不盡。
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