[求救] 跪求E.coli strain: BL21-codon plus(D …

看板Biotech作者 (阿矇)時間14年前 (2011/08/14 23:59), 編輯推噓4(4013)
留言17則, 4人參與, 最新討論串1/1
我是交大的學生 最近在表現一個分子量100KD多的蛋白 我選用pET30b做vector 表現量卻不高 (IN Novablue(DE3) & BL21 (DE3)) 由於表現的基因GC%很高 因此懷疑可能因此造成表現量較低 希望版上哪位先進有 E.coli strain: BL21-codon plus(DE3)-RP 或是 E.coli strain: BL21-codon plus(DE3)-RIPL 或是 Rosetta 系列的菌(目的是想補充稀有密碼子,目前最想要這隻...)都可以 的菌株....可以向您要...我可以買飲料或是中晚餐交換QQ 如果再比較遠的地方我可以付郵寄費用....謝謝,.... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.113.173.247

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我有我在台南...既然妳在新竹我知道清大有誰有..
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Rosetta系列的菌也可以...目的是想補充稀有密碼子....
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樓上版大能寄信跟我說嗎QQ謝謝!
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※ 編輯: mournermind 來自: 140.113.173.247 (08/15 01:16) ※ 編輯: mournermind 來自: 140.113.173.247 (08/15 01:24)

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分子量很大,真的確定是 rare codon 的關係嗎?
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http://gcua.schoedl.de/ 先 check 看看吧~
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如果真的有缺密碼子再看要哪個 strain
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我自己用過 rosetta 和 origami 那些系列。
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因為菌裡做了很多 modify, 反而用起來比酵母菌難用。
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ArcticExpress系列做inclusion body還蠻不錯的。
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應該是太大了 之前實驗室有人做過 800aa就幾乎做不出來
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大部分E.coli蛋白只有200-300aa 太長它會罷工XD
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因為我用rare codon calculater比對過 似乎rare codon
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有點多...
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謝謝大家的意見!我在跟老師討論看看!
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謝謝icome 不過我不敢隨意捷短因為這是要做抗體的
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蛋白...我怕到時候表現出來的不是native蛋白展露在外
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的就糟糕了...而且沒有結構可以比對QQ所以沒法猜...
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文章代碼(AID): #1EH_3Olj (Biotech)