[求救] 加入FBS的medium用.45過濾

看板Biotech作者 (吸血鬼螞蟻)時間14年前 (2011/08/13 11:43), 編輯推噓14(14推 0噓 17→)
留言31則, 15人參與, 最新討論串1/1
之前配細胞用的medium時 我們都先把DMEM+PS用.22過濾以後 再加入血清 我有牢牢記住前輩跟我說的 FBS會卡在濾網上過不去喔！ 啾咪～ 這陣子要用的293FT的cell line 在看使用手冊的時候發現 他叫我把所有的東西都放進medium以後（包含10% FBS） 用.45的filter過濾 這...我應該照做嗎？ 還是我跟之前一樣，把其他的東西加一家加濾以後 血清最後再加呢？？？ 我實在不想浪費貴鬆鬆的材料阿...而且 medium一失敗 我所有的東西就都要重買了 包刮cell line呢... 請大家給我建議 我已經爬過文了 有看到之前某大大用.22過濾結果一直被卡住的例子 難道.45就可以順利的過去？？？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 211.86.156.114
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.45>.22 就這樣......
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那個...我知道 可是我想知道他到底夠不夠大...
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推
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.45過了並非無菌~只能算過雜質罷了
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推
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推樓上~.45不能保證無菌!何且為啥一定要加血清一併過濾呢?
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血清如果怕有雜質 可以用離心先離掉~
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所以就不論他的手冊怎麼寫 我最後再加摟？
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3,4樓大大 .45真的無法無菌?! 實驗室不能滅的都只過.45耶
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一般要無菌都是過.22吧
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.22是比較保險 .45沒實驗過 但是一般來說.22比較貴
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我們lab都加了FBS過.22的filter OK的!
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樓上要看用哪個牌子的filter,有些聽說容易塞~Orz
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推
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歐歐~的確 我們都用millipore的 一次過5L 不太塞
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沒有必要 而且一般的FBS都已經過濾過了 都是無菌的
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現在很多買來的FBS都是已經去補體＋無菌的可以直接用了！
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如果怕的話 millipore 還不錯用 costar則是很容易塞住
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推
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.45應該只是要去雜質而已 就像收virus或CM時
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做cell culture的煩請過.22才能算無菌(但去不了黴漿菌)
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不然就是autoclave,只過.45的只能算去雜質~
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FBS買來就是無菌的阿，除非解凍過程中產生蛋白質凝結，然後
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你看它很礙眼，那就加入medium過 .22
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應該只是為了過FBS中的雜質 我看過有人這樣過 但是若
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要無菌 45不保險喔 不如FBS不要過 因為他過只是為了
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去沉澱雜質
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其實你可以看你們買的FBS上面是否有註明說已經過濾滅
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菌 如果他有一個像沙漏的圖示就代表已有過濾滅菌
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那就算你不過濾 直接加也可以啦
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如果本身沒有過濾滅菌 那你就過.22的 我過是沒塞住過
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推
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我FBS都直接分裝加入culture中,過濾會把裡面一些東西率掉
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推
09/07 18:49, , 29F
其實大部分的細菌，size都大於0.5um,因此才會有用0.45
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過濾的做法出現。黴漿菌大概是大腸桿菌的十分之一大小。
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但以我自己的經驗，點22或點45都會長mold
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