[求救] 請問是否有去除IgG的方法?

看板Biotech作者 (奈奈)時間13年前 (2011/07/10 03:03), 編輯推噓3(3推 0噓 7→)
留言10則, 5人參與, 最新討論串1/1
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 我想要進行免疫沉澱法(IP)， 但是跑完SDS-PAGE之後， 我發現我想觀測的蛋白質位在 56 kd的地方 會被抗體的重鏈給擋住， 會有一條非特異性的 band， 請問有沒有任何方法可以去除或改善呢? 不然我永遠不知道我IP下來的蛋白質表現量是不是有變化 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.27.51.206
推
07/10 07:42, , 1F
有些公司有在賣，你打電話問一下就可以了。
07/10 07:42, 1F
→
07/10 11:06, , 2F
可以跑nonreducing,就不會overlap到你的target了
07/10 11:06, 2F
推
07/10 14:18, , 3F
考量到你target protein Ab能否認到non-reducing form的
07/10 14:18, 3F
→
07/10 14:19, , 4F
epitope 你可以考慮選用不會認reducing form的2抗 或是把
07/10 14:19, 4F
→
07/10 14:20, , 5F
ProteinA/G與Ab做crosslink
07/10 14:20, 5F
→
07/12 21:00, , 6F
Pall 有出 IgG Deletion kit.我之前做2D 時有用過!!
07/12 21:00, 6F
推
08/03 13:19, , 7F
我最近也有這個問題XD 我想請問各位如果我改用二抗使用
08/03 13:19, 7F
→
08/03 13:22, , 8F
如果一抗rabbit Ab那我二抗用anti-rabbit light chain
08/03 13:22, 8F
→
08/03 13:24, , 9F
只去認light chain是不是可以避免這個問題
08/03 13:24, 9F
→
08/03 13:29, , 10F
(上面有點混亂XD sorry)
08/03 13:29, 10F
‣ 更多 rolajohan 的文章
文章代碼(AID): #1E6AN_wQ (Biotech)