[求救] PCR跑出來的BAND不好看

看板Biotech作者 (tenhiko)時間14年前 (2011/06/28 02:55), 編輯推噓4(4推 0噓 16→)
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小弟剛開始跑PCR，跑出來的BAND老是這個樣子 請問各位這是出了甚麼問題呢 附上圖片 http://ppt.cc/at~x http://ppt.cc/KeIE -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.62.151.32 ※ 編輯: tenhiko 來自: 61.62.151.32 (06/28 02:58)
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看起來是你膠沒有泡好 不然就是電極走位了
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06/28 10:11, , 2F
之前我忘記用TAE去製膠 用ddwater製膠跑出來也是這樣...
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推
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你的primer感覺不太好 應該加個internal control試試才知
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PCR有沒有問題 或是你的template有沒有問題...之類的
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要control，不然很難知道問題底。
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像在打小蜜蜂...
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膠應該沒問題marker滿清楚的 應該是PCR sample或dye的問題
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sample沒有分布到整個well中,dye可加多或換dye試試看
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鑄膠的時候不要太快拔comb,拔的時候也小心拔
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做膠的時後,讓膠慢慢冷卻(有一次我放冰箱就會這樣)
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或是TAE用太多次,發熱,讓膠有點溶
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推
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No 是 overloading
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推
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推overload一個
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06/28 22:54, , 14F
我覺得不是overloading,相對不亮的band也是同樣pattern
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甘油太多！
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marker糊的! 膠有問題吧? 看是不是配錯濃度?
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膠沒做好 MARKER雖然有出來 但是是糊的
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推
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我也覺得是overload
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07/13 18:50, , 19F
膠要慢冷卻, 有primer dimer, primer品質不好,
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07/13 18:51, , 20F
還有看起來歪歪的, 不是膠沒均勻就是電極有問題
07/13 18:51, 20F
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