[求救] SDS PAGE跑膠 marker會糊掉

看板Biotech作者 (Je t'aime)時間14年前 (2011/06/14 21:37), 編輯推噓1(1推 0噓 11→)
留言12則, 4人參與, 最新討論串1/1
最近跑SDS PAGE時 marker都會糊掉 從stacking下來時會分的很漂亮 但越跑越下面 72kDa以上的marker就會漸漸糊掉 而72以下的marker也會有smear的現象 勉強壓完片 high MW的protein都有smear的情形 我用的是12%的膠 上層用80V 下層用100V 之前都沒啥問題 但現在卻老是出問題 不知道有人遇到過同樣的問題嗎 希望有高手能伸出援手 拜託了~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 58.115.130.41
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06/14 23:59, , 1F
smear?
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06/15 00:00, , 2F
可能有很多原因，最有可能是漏膠(膠體結構跑掉了)，還是..
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running buffer濃度有誤? 甚至maker變質?
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"stacking下來時會分的很漂亮"也不是SDS-PAGE成功與否的
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指標。
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check你任一buffer之pH值；APS是否新鮮?
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推
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Acrylamide換新的看看? 放很久了嗎?
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也就是下層膠沒辦法分離 那應該先猜下層膠沒做好
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先不要管running buffer， Acrylamide、 APS先配新的
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下層膠的TRIS跟上層膠的PH值不同 這個也要注意一下
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先看看是不是如同 vita895 說的 maker 保存不當 換管新的跑
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06/21 20:17, , 12F
或是跟隔壁鄰居借看看
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