[求救] primary neuron culture contamination

看板Biotech作者 (心情真好~)時間14年前 (2011/05/14 20:36), 編輯推噓0(002)
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各位好,目前碰到一些細胞污染方面的問題想請教各位。 因為一些原因所以沒辦法照相,但我會盡量描述希望能得到原因及解答。 ---------------------------------------------------------------------- 先簡單提一下我的步驟: 我是取 P0大鼠的腦 (去除midbrain及cerebellum)的部分,再利用papain lysis 計算完細胞量後,seeding至dish或well中,6hr後更換成 serum-free的medium (含glumate, glutamin, neurobasal, pen/ster, B27),並會在第四天加入5um Ara-c。 到第六天則會換成Glutamate free的medium飼養。 --------------------------------------------------------------------- 今天發現污染的時候是準備要加Ara-c的第四天 (第三天仍無發現污染的現象)。 剛從incubator拿出來時medium呈現偏橘色(不到黃色)混濁的狀態 (有聞到怪味)。 在顯微鏡下隱約還可見到細胞,但有許多顆粒懸浮的感覺。 約過十分鐘後,原本偏橘色的medium回復成原本的混濁紅色。 從well下方透過燈光看,輕輕搖有沙沙狀的感覺;放置一段時間後有白色的細小顆粒 沉澱在well底部。 ---------------------------------------------------------------------- 爬文過後 覺得有點像是yeast的汙染 (我自己是從沙沙狀及發現污染的時間推測, 不確定是否正確,有錯請給予指教^ ^)。 想請教各位有可能是哪類型的汙染 導致的原因又可能是甚麼? ps. 有看到精華區的文章說不可以喝養樂多 = =a 謝謝各位了~ -- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 125.225.134.61 ※ 編輯: takkyu 來自: 125.225.134.61 (05/14 20:37)

05/18 00:13, , 1F
顯微鏡可以看到很多很小一粒粒的小球 應該就是yeast
05/18 00:13, 1F

05/18 00:14, , 2F
通常操作時手不乾淨比較容易有yeast(個人感覺)
05/18 00:14, 2F
文章代碼(AID): #1DpdTK_R (Biotech)