Re: [求救] SDS-PAGE烘膠問題

看板Biotech作者 (軒)時間13年前 (2011/05/13 11:52), 編輯推噓6(608)
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※ 引述《kikyoooooooo (kikyo~)》之銘言: : 大家好,我是遭遇到問題的SDS-PAGE新手 : 我想把gel烘乾, : 我把退染後的膠體先泡在水裡15-30分鐘, 我們實驗室的做法會先泡在50%酒精+少許glycerol裡 能使膠體脫水(縮小好封pattern也會較清楚)並且也會變硬一些 : 然後,包在浸濕的玻璃紙內, : 把這個東西以兩片玻璃夾住, 準備一片玻璃墊高上面加水 鋪上第一層浸濕的玻璃紙 (面積須大於玻璃 與玻璃間不能有氣泡) 膠體表面稍微清洗一下後放到玻璃紙上 (同樣不能有氣泡) 加水並鋪上第二層浸濕的玻璃紙 (同樣大於玻璃 也不能有氣泡) 之後將4周超出玻璃部分的玻璃紙 往4周拉緊折到玻璃後面 以長尾夾固定四個角 : 50度或室溫放乾, : 結果都裂掉了, 放室溫下晾乾 沒試過高溫烘就是了 : 查了一下,發現大多數的人都會接著進行western之類的, : 不知道我該去哪找到更多的相關訊息, : 或是有經驗的版大們有甚麼建議呢>< : 3Q 以上是我們LAB的做法 給你參考~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.115.48.144 ※ 編輯: shenhsu 來自: 140.115.48.144 (05/13 11:53)

05/13 11:57, , 1F
室溫是照S大的方法,高溫是用gel dryer(邊加溫邊抽氣)
05/13 11:57, 1F

05/13 14:33, , 2F
請問這樣需要用幾片玻璃勒?
05/13 14:33, 2F

05/13 14:48, , 3F
玻璃不就一片 你是想問玻璃紙??
05/13 14:48, 3F

05/13 15:20, , 4F
我以為需要用兩片玻璃夾住??
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05/13 18:04, , 5F
不用夾啊 底下一片就好 也許就是夾了擠壓到所以破掉?
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05/14 01:01, , 6F
玻璃只是拿來墊的當墊板,玻璃紙要兩張夾住MEMBRANE
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05/15 00:39, , 7F
覺得封膠需要練習~像我不常作,膠都要封很久,所以現在我都
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05/15 00:40, , 8F
拿透明夾鏈袋,把膠放進去,然後氣泡趕一下,就掃描了~
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05/15 00:40, , 9F
還蠻清楚的~只是膠無法永久保存~不過照片可以阿
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05/16 12:06, , 10F
當你投paper就知道 我隔壁實驗室遇過被要求寄dry的PAGE
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05/16 12:06, , 11F
去被審核 原因是因為乾之前跟之後掃起來有差異 他們要看
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05/16 12:07, , 12F
重要的data還是好好的封起來保存 免得某一天被要去看
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05/16 16:13, , 13F
謝謝大家寶貴的建議,我只能說ptt真是個溫馨的地方><
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05/18 10:58, , 14F
我成功封出美美的膠了!YA~~~感謝大家
05/18 10:58, 14F
文章代碼(AID): #1DpAhdLg (Biotech)