[求救] NO assay 製備是否出了甚麼差錯
大家好
最近要做NO assay，然後自己配Griess reagent
配方是以下
0.1% N-1-napthylethylenediamine dihydrochloride (NED) in water
1% sulfanilamide in 2% phosphoric acid
然後這是我的步驟，請大家幫我看看這樣可以嗎?
如果全部想要配成20mL
那請問是
1. 先配2% phosphoric acid
取400μl phosphoric acid + 19600μl
2. 再加入0.2g 的1% sulfanilamide
3. 再加入 0.02 g 0.1% N-1-napthylethylenediamine dihydrochloride
Standard 的濃度是0, 5,10, 25, 50, 100uM
NaNO2分子量=69
那我配100 uM方式
x/69=0.1M x 0.01
x=0.069 g 0.069g + 10mL 是0.1M
再取10 ul +9990 ul
即為100 uM
請問是嗎?
不好意思麻煩大家
我網路上看了許多protocol，可是實際操作吸光值卻呈現不出來
想說是配藥的過程有甚麼差錯嗎?還是有可能是藥放太久?
(化學藥劑至少兩年了，而且是都分裝到50mL離心管中)
這裡先跟大家說謝謝了
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每個人都把希望寄託在未來，
卻忘了未來是由每個現在所組成。
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.143.163
推
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