[閒聊] 蛋白質定量方法

看板Biotech作者 (SPEC)時間15年前 (2011/04/03 16:26), 編輯推噓5(503)
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有人是用280 nm吸收,用beer's law來換算濃度 有人是用BSA來當標準品來換算 若是粉狀的天然或動植物萃取抽乾後的蛋白質,可用稱的直接換算 (但有人提到會有水氣= =,有差這麼多嗎? 要是全乾應該就很少) 而最好的方法是用ELISA吧,若是有這蛋白質的標準品和抗體,最好還有內標品 大家是用甚麼方法定量蛋白質呢 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 111.240.97.165

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protein assay
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04/03 20:44, , 2F
Bradford assay
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阿 第二行就是說Bradford,想請問用280 nm的吸收也就是第一行講的方法準嗎 ※ 編輯: ninomae 來自: 111.240.97.165 (04/03 20:56)

04/03 23:31, , 3F
用280nm我會把protein denature之後量
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04/03 23:43, , 4F
Bradford不是測280吧, 是測coomassie blue 595 nm
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我用280nm量(denature狀況下)用來作ITC的sample
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ITC做的是protein-protein binding 最後fitting的時候
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04/04 00:30, , 7F
stoicheometry N是1.05左右 所以我覺得還蠻準確的 給你參考
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04/06 21:02, , 8F
請問如果樣品不是BSA 那麼如何把BSA當標準品換算呢
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文章代碼(AID): #1Dc2yy5h (Biotech)