[求救] p53磷酸化的結果不一致
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章----
大家好~(*^v^*)
最近我開始接觸細胞實驗
所以剛開始 學姊是希望可以重複他的結果
但是阿 我怎麼做結果都跟學姊的相反...(= =)
討論也找不到原因,因此希望可以有人可以幫幫忙~~~
實驗目的是有兩株細胞(A和B)
然後利用UV(或是HU)造成damage後,看p53磷酸化的表現
學姊的結果都是A比B高,但是我怎麼做都是B比A高
以下為實驗過程,不知道哪裡比較有可能發生問題~
(因為最近才第一次接觸這個 所以很怕有明顯錯誤自己卻不知道...)
1.於6mm dish種5x10五次方的細胞於隔天
(細胞數會太多嗎???太多的話是不是會影響實驗結果勒???)
2.將貼附好的細胞的medium吸乾,照UV(100 J/m2)
照完加入medium培養不同時間點
3.於不同時間點將細胞medium吸乾,用冰的PBS洗一次,
加入lysis buffer把細胞刮下來,冰-80度西到隔天
4.離心取上清液定量
以上就是我處理細胞的過程,不知道有沒有哪裡做的不好還是做錯的部分
謝謝大家 歡迎糾正~~~>"<
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.36.0.199
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