[求救] 樹脂純化產生褐色沉澱 ?
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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最近在做的一項實驗是想利用質體上含有的chitin binding doman
加入DTT切除後希望在PAGE上能夠看見我的質體片段
由於我的片段上有His,老師要我用樹脂來純化,但在ELUTE的部分換成含有DTT的buffer
一般我的純化步驟則是：
DI→0.1M Ni→DI→starting buffer→破菌後的菌液
→starting buffer→Elute→DI→EDTA→DI
但是發現把Elute改成DTT的buffer加入後樹脂馬上變成褐色,
老師說是我在第二次的Starting buffer後要用DI再把imidazole洗乾淨
實在很想知道問題到底出在哪邊!!!???
不好意思我是分生新手~麻煩各位為我解答一下>"<
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03/27 16:06, , 1F
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