[求救] Ficoll分離臍帶血後結塊
各位學長姐好
小弟最近兩個月遇到一個很麻煩的問題
我是用Ficoll-paque將臍帶血分層(血:PBS = 1:4)
取霧霧的Mononucler層後
離心清洗(200g 10min)兩三次後(50ml離心管)
收集成一管(15ml離心管)
但最近發現在離心第二次後
細胞的pellet很難打散
都會黏起來，很像脂肪組織...
到最後要收集成一管，離完心會有一半的pellet打不散....
最慘的是
在ficoll部份做完，染完MACS的磁珠抗體
收下來的CD34+細胞竟然放一下也會自動結塊 囧
這導致我能從臍帶血收割到幹細胞的收割率只有20%...
而且細胞數都頂多剛剛好讓我種重要條件
更可怕的是還不知道這樣的細胞養不養的起來 囧
(第一次出現這種情形時是養不起來的...)
想請問有經驗的前輩
問題到底出在哪裡呢 orz...
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標題 [新聞] 兄弟愈戰愈勇 最快周五點燈「M10」
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