[求救] 蛋白質溶於sample buffer後產生沉澱

看板Biotech作者 (JOJO)時間13年前 (2011/03/03 12:57), 編輯推噓1(1推 0噓 7→)
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各位前輩 小弟在做蛋白質純化的時候 產生了一些問題 我是用RIPA來做蛋白質萃取 最後以15000 RPM離心取上清液 保存在-20度C 結果在經過一兩次跑WB之後 SAMPLE開始產生沉澱 有白色棉絮狀的物體出現 有的直接產生沉澱在管底 請問這是蛋白質再析出嗎? 不知道有甚麼方法可以將他在回溶於BUFFER中的? 謝個各位學長姐 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.60.122.14
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有時候析出的不見得是你的蛋白 有可能是其它的雜蛋白
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建議你離心之後跑個PAGE確定看看吧
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最近一次跑WB的結果是表現亮有非常顯著的差異
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我每次跑的時候也會先VORTEX再離心
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SDS沈澱？？
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推
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有沒有照片
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我也是煮完放冰上放久了會沉澱...
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打原在跑WB，跑出來沒影響...
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