[求救] 想請問RAW264.7 cell的osteoclast分化實驗
我的RAW Cell是從食工所買的
用DMEM high glucose (4500mg/L), 10% FBS, 1% sodium pyruvate
seeding density是 3.5*10^5 / well (6-well plate)
以上分別參考食工所的建議配方和methods in molecular medicine
RANKL
用的是PEPROTECH 50 ng/ml (final conc.)做treatment
實驗流程是(用第十一代的細胞)
第一天加RANKL後 第四天再換新MEDIUM和RANKL
第七天做觀察
可是用顯微鏡觀察 看到的分化的osteoclasts不多
paper上的 都還蠻多又大的 並且有多個細胞核在一個細胞內
另外 細胞的觸角也不少
所以想請問
我的流程哪裡有誤?
需要更改?
或是有什麼撇步?
希望有做過的板友可以分享一下
謝謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.35.154