[求救] 這...我想是神的旨意吧!!

看板Biotech作者 (Optometry Baby)時間15年前 (2010/12/21 23:09), 編輯推噓4(4014)
留言18則, 6人參與, 最新討論串1/1
我不是要問實驗步驟的問題,不過又跟實驗有關係,囧rz 小弟我碩士班畢業後當研究助理,不過遇到了一個小小的trouble 最近再做細胞培養,細胞只要解凍完後繼代就會養不起來(其實就是汙染了) 前面的幾次汙染都有抓到原因,不過也花費了好多時間,因為這邊實驗室都用 75t養細胞(貼的細胞),然後從上禮拜開始連續兩天都發現75t內裝了10ml的培養基 漏了出來,第一次發現不以為意,想說可能是蓋子鎖太緊或是沒鎖緊的問題進而產生 壓力差???所以導致其中一盤75t內的培養基都跑出來漏光光了(當初還有想到 是75t有裂掉之類的問題,不過看一看也沒事),不過當我補滿培養基後,隔天在觀察 細胞成長狀況,另一盤75t也漏出培養基了,(10ml的雞也跑光了,囧),重點是 我想問各位大大,有沒有遇過類似的問題,因為水盤水滿多的,而這漏出來20ml的培養基 搞得incubator酸酸臭臭的,細胞也又開始污染了,囧... 如果這是"正常現象"有人能夠經驗分享嗎?!我是想問那個培養雞出走,是"正常"的嗎?? 我臉都綠了...每天開incubator像是對樂透彩 = = -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 58.115.122.217

12/21 23:16, , 1F
你看你有沒有得罪誰吧 75T要medium全部漏光也很難
12/21 23:16, 1F

12/21 23:16, , 2F
如果耗材一切OK 人為因素比較大
12/21 23:16, 2F

12/21 23:17, , 3F
有個TEST方式 以下次養的時後多養幾盤分別標上不同人的
12/21 23:17, 3F

12/21 23:17, , 4F
別讓人看出來是你的細胞
12/21 23:17, 4F

12/21 23:18, , 5F
另外就是check 之前凍的細胞的確是ok的
12/21 23:18, 5F

12/21 23:21, , 6F
感謝你的回答 不過整個實驗室只有我在弄細胞, 所以INCUBATOR
12/21 23:21, 6F

12/21 23:21, , 7F
這幾天都是空的,囧...之前凍的細胞 老闆是說都ok 我解凍完
12/21 23:21, 7F

12/21 23:22, , 8F
也沒異常, 不過只要SUBCULTURE就汙染PBS, MEDIUM都CHECK過了
12/21 23:22, 8F

12/21 23:23, , 9F
不是很想懷疑TRYPSIN...以及我的操作手法, 但是75T MEDIUM漏
12/21 23:23, 9F

12/21 23:24, , 10F
光, 我看要請李組長出來看看了 囧RZ
12/21 23:24, 10F

12/21 23:47, , 11F
75T是哪一間的? 拿的時候瓶口稍微朝上
12/21 23:47, 11F

12/21 23:48, , 12F
然後 INCUBATOR 鐵盤要清 水盤要用滅菌水更新 不然還是會掛
12/21 23:48, 12F

12/22 04:50, , 13F
就改用 dish 養就好了
12/22 04:50, 13F

12/22 09:23, , 14F
是漏到流出來還是蒸散?incubator溫度跟CO2濃度正確?
12/22 09:23, 14F

12/23 17:36, , 15F
只有你在養細胞? 實驗室只有你一個人?
12/23 17:36, 15F

12/23 21:29, , 16F
你繼代培養時有沒有為了把細胞打散而敲T75?
12/23 21:29, 16F

12/23 21:30, , 17F
以前實驗室用敲擊的方式把細胞敲散繼代培養,學姊都沒問題
12/23 21:30, 17F

12/23 21:31, , 18F
結果我一去就敲裂好幾個,T75還蠻不耐撞的
12/23 21:31, 18F
文章代碼(AID): #1D4CCjg- (Biotech)