[求救] 常做不出結果

看板Biotech作者lovepurely (c )時間15年前 (2010/12/20 02:17)推噓2(2推 0噓 3→)

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最近老師希望我做Gelatin Zymography的實驗，但是實驗結果成功機率幾乎只有二分之一。我的實驗過程將電泳槽全程on ice，接著就是用renaturning buffer wash，每三十分鐘換一次，共wash兩次，然後就是用wash buffer 每十分鐘換一次，最後就是uncubation buffer overnight，可是有時候會有MMP-9,MMP-2 band出現，有時候又都不會出現，整片gel都是trypan blue 的藍色。這困擾我很久，每次操作手法都相同，但卻不能有一致的結果產生，可以有人幫我解釋一下可能發生的問題嗎？會跟tris base pH 8.8 OR pH 6.8 OR running buffer有關嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 112.104.22.116

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natual

12/20 09:26, , 1^F

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推

nerdz

12/20 16:00, , 2^F

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nerdz

12/20 16:01, , 3^F

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