[求救] 用ficoll分層無法離下紅血球

看板Biotech作者 (三立男孩~~)時間15年前 (2010/12/12 23:48), 編輯推噓3(3推 0噓 2→)
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不好意思，有個問題請教大家 我在取小鼠脾臟的淋巴細胞 取出脾臟後以500rpm離心1 min 再取上清液緩緩加入ficoll中 我在加入ficoll時為了讓分層能更明顯 所以把15 ml離心管傾斜讓加入之液體流速可以更加緩慢 結果離完後(720 RCF,30 min)有部分紅血球附在應該是buffy coat所在位置的管壁上?? 紅血球不是比較重嗎? 怎麼會附在分層附近的管壁上? 那如果事情已經發生了 可以取出來重新加入ficoll再離一次嗎? 謝謝~~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.104.56
推
12/13 01:44, , 1F
離心轉子是定角的嗎? 要不要試試搖臂式的
12/13 01:44, 1F
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12/13 01:47, , 2F
Ficoll很難做第二次，濃度不準，sample就混了
12/13 01:47, 2F
推
12/14 13:01, , 3F
可先確認ficoll 是否過期或者汙損 如果都沒有就先把離心
12/14 13:01, 3F
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12/14 13:03, , 4F
後的先破gradient 之後再重新加入一次ficoll 但不建議
12/14 13:03, 4F
推
12/15 22:58, , 5F
那些我猜會不會只是被血紅素染色的WBC
12/15 22:58, 5F
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