[求救] 請問ISSR的PCR

看板Biotech作者 (別小看我...)時間13年前 (2010/11/05 18:14), 編輯推噓0(002)
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ISSR的實驗 PCR條件: template: Genomic DNA : 20ng primer: 0.8UM 94度 3mins ---------------- 以下35cycles 94度 30s 50度 30s 72度 2mins ---------------- 72度 7mins 4度 保存 有些跑出來會這樣! 下 10ul去跑的膠 會什麼會有一大坨在上面? 正常嘛? http://www.wretch.cc/album/show.php?i=wcc28895129r&b=1&f=1294808507&p=1 另外如果下5ul也是一樣!有smear!! http://www.wretch.cc/album/show.php?i=wcc28895129r&b=1&f=1294808505&p=0 麻煩解答依下!! 會不會是DNA太雜了!!所以,P出依推東西,所以smear!! 在ISSR中這樣的primer就不要用了!!!謝謝!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.69.175.253

11/08 15:20, , 1F
你的推論可能是對的,懷疑是在PCR過程的非專一性反應
11/08 15:20, 1F

11/08 15:20, , 2F
只有特定的lane會smear,看起來應該不是templet加太多XD
11/08 15:20, 2F
文章代碼(AID): #1CqzaLfG (Biotech)