[討論] Western Blot電泳所遭遇到的問題(已解決)

看板Biotech作者 (ccc)時間15年前 (2010/10/26 14:29), 編輯推噓4(4推 0噓 7→)
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最近幾次跑完電泳 準備作transfer時 發現下層膠下面1/3的地方產生波浪狀的鄒折 marker 55kd 以下都跑到歪 且無法辨識 最近一次更誇張準備 TRANSFER時 尚未拆開玻璃取出膠 膠就在片玻璃間就產生明顯的皺折 難怪當時覺得SAMPLE無法繼續往下跑 請問這可能是哪裡發生問題? 有聽說過換掉電泳設備裡的金屬絲 便能解決此事 不知道是否有其他建議 謝謝 ----------------------------------已解決------------------------------ 後來將泡上下層膠的tris-hcl 全部重泡 就沒再發生這個問題了 提供給大家參考 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.64.247.100
推
10/26 16:16, , 1F
檢查一下鑄膠時有沒有漏
10/26 16:16, 1F
推
10/26 17:01, , 2F
acrylamide裡面是否有雜質?
10/26 17:01, 2F
→
10/26 21:09, , 3F
鑄膠是沒有問題的 凝結後對過標記位置 沒有漏
10/26 21:09, 3F
→
10/26 21:14, , 4F
請問為何會認為是acrylamide的問題呢?
10/26 21:14, 4F
推
10/27 15:19, , 5F
有些品質較差的acrylamide裡面會有懸浮物，以前
10/27 15:19, 5F
→
10/27 15:19, , 6F
實驗室會過.22 filter 確保裡面沒有particle
10/27 15:19, 6F
→
10/27 15:20, , 7F
也有可能是凝膠凝得太快，裡面polymerization不均勻
10/27 15:20, 7F
推
10/27 16:31, , 8F
overheat?
10/27 16:31, 8F
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10/27 19:45, , 9F
acrylamide是Bio-Rad 品質應該OK 不過我會再注意
10/27 19:45, 9F
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10/27 19:48, , 10F
沒有過熱 電泳怕過熱出現smile效應 電泳槽都是浸在冰內
10/27 19:48, 10F
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10/27 19:48, , 11F
電泳結束後都有確認裡面的溫度
10/27 19:48, 11F
※ 編輯: kcc0606 來自: 123.204.17.158 (11/11 21:40)
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