[求救] real time PCR 不穩定的結果
各位大大晚安,希望大家可以幫我一起解決這個問題。
最近我正在做real time PCR,但是結果都不盡理想。
我使用的機型是roach Light Cycler 480,probe 是使用Taq man的系統。每一個sample
我都進行兩重複。
在進行反應時,我在同一個well中同時加入了兩組的primer和probe(reference gene
和target gene,進行standard curve也是同樣)。但是,試了好幾次的結果,通常只有
reference gene的結果是偵測的出來,而且cp值相差不遠,算是好結果。
但是target gene就會呈現偵測不到,或是一個有偵測到,一個沒有。
我想問,為什麼我的實驗結果會這樣,是因為我將兩組的primer和probe混合在一起嗎?
還是有其他原因呢?
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