[求救] 定序出現問題

看板Biotech作者 (蘋果尾魚)時間15年前 (2010/10/20 22:03), 編輯推噓3(3推 0噓 0→)
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想請問一下 我用PCR批出一段基因序列(約1500bp) 送去生技公司定序後發現 Forward primer在讀到約200bp時,開始出現雙重peak 不過我再送定序前有做gel extration 造理說應該不會有雜bend才對呀!! 就算有雜bend,應該也在一開始定序就要有雙重peak 生技公司給我的建議是重新訂購primer... 不過我很疑惑為什麼在定序到一半時會有雙重peak啊~~ 有人有這樣的經驗嗎?? 後來是如何解決的呢? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.116.13.191
推
10/21 00:11, , 1F
檢查一下是不是有重複序列造成的frameshift
10/21 00:11, 1F
推
10/21 00:16, , 2F
有切單一band並不代表產物就是純的
10/21 00:16, 2F
推
11/25 00:25, , 3F
切膠後還有這情形 就要做Cloning了唷 ㄎㄎ
11/25 00:25, 3F
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