[求救] 活化的RAW

看板Biotech作者 (酒是我最好的腮紅)時間15年前 (2010/10/19 15:49), 編輯推噓4(4推 0噓 6→)
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發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 最近在做RAW吞噬能力的實驗 LPS組和 LPS+polymyxin B組還算正常 但medium組一直都很高...大概該LPS刺激的差不多>_< 本來有擔心會不會是Medium有污染 加做了Medium+PMB仍一樣高 爬了文發現RAW有活化的問題 可能我的細胞是活化狀況的RAW 長觸手的細胞應該有個6成吧(聽說要5-10%以下 大部份應該是圓圓的細胞兒) sorry~當助理才第一次養這株細胞 lab裡又沒學長姐可問 嗚... 有人說細胞量太少-->RAW會活化生出觸手-->放一天長滿一點隔天就以做 細胞量太多-->RAW活化-->分盤seeding少一點,養幾天後再做 可是我試過...都沒用啊>____< 想請問: 1.RAW應該seeding多少量?(per ml) 2.已"活化的RAW"會因為培養個幾天而變回"非活化的RAW"嗎? os:經濟部的計劃真得是...很夭壽很麻煩!@#$%^... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.5
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10/19 17:16, , 1F
我的經驗 長腳的(活化)不太會再變回圓的~重新解凍新的
10/19 17:16, 1F
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10/19 17:19, , 2F
seeding 要用刮的或是拍下來 不要用切的~
10/19 17:19, 2F
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10/19 17:24, , 3F
我是50-100萬/10ml(10cm dish) 放兩至三天就會八成滿左右
10/19 17:24, 3F
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10/19 18:43, , 4F
對 活化的不會變回來非活化了 請解凍新的
10/19 18:43, 4F
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10/19 19:09, , 5F
長腳就爆了 以前經驗
10/19 19:09, 5F
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10/19 20:39, , 6F
是macrophage就會長出腳, monocyte才是圓圓的
10/19 20:39, 6F
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10/19 20:40, , 7F
作吞噬,本來就該是macrophage 才有意義
10/19 20:40, 7F
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10/20 13:05, , 8F
感謝m大的建議~我會此量seeding看看的!
10/20 13:05, 8F
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10/20 13:05, , 9F
我不用trypsin切~都是用pbs或medium沖下來的
10/20 13:05, 9F
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10/20 13:07, , 10F
非常感謝大家的建議~我會乖乖跟別家lab要細胞重新解凍
10/20 13:07, 10F
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