[求救] renilla冷光測不到

看板Biotech作者 (polar bear)時間15年前 (2010/10/19 15:42), 編輯推噓2(201)
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實驗是以pGL3接要測定的Promoter作為test reporter pRL-TK 作為internal control,雙冷光系統進行 plasmid比例pGL3:pRL-TK = 10:1(2ug:0.2ug)/well 在12well盤 transfection4~6小時,換有10%FBS的DMEM,培養24小時後 用promega公司的Dual-Glo luciferase assay syste分別偵測冷光值 問題來了 firefly luciferase的值有破萬 renilla luciferase的值跟背景值差不多(沒有破百) 也單獨轉pRL-TK vector進hela cell做測試,結果還是一樣 想請問有相關經驗的各位 有可能問題出在哪? 或是有含renilla基因的plasmid近期測試working正常,可以分一點給我嗎? 感激不盡。<(_ _)> -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.60.122.10 ※ 編輯: sabayal 來自: 210.60.122.10 (10/19 15:46)

10/19 16:20, , 1F
建議您定序或以限制酶檢查一下plasmid是否正確
10/19 16:20, 1F

10/19 20:38, , 2F
請問你有Stop&Glo續加在LARII裡嗎? 這兩劑不能分開
10/19 20:38, 2F

10/19 20:39, , 3F
promega這支產品的特性是要加在一起的
10/19 20:39, 3F
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