[求救] 關於養細胞的汙染

看板Biotech作者 (民國的福爾摩斯)時間13年前 (2010/09/26 18:47), 編輯推噓7(7推 0噓 35→)
留言42則, 12人參與, 最新討論串1/1
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 最近養的細胞有部分汙染 而且都在繼代培養後3,4天才出現細菌 但是一開始剛繼代完的medium都是很澄清的 當然我看不出汙染也大有可能 這中間當然都沒動過medium 只有拿出來觀察 想請問版友會發生這種養了好幾天才出現汙染的情況嗎？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.94.44
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09/26 22:53, , 1F
我也有這樣的經驗 大約也是3, 4 天
09/26 22:53, 1F
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09/26 22:54, , 2F
後來我就細胞養三日必換培養液 想說可能抗生素失效
09/26 22:54, 2F
推
09/26 22:56, , 3F
砍掉重來....最乾脆簡單的方法
09/26 22:56, 3F
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09/26 23:01, , 4F
一樓做法不對,細胞沒污染就不會跟有無抗生素有關
09/26 23:01, 4F
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09/26 23:02, , 5F
通常會有原po這樣,會跟抗生素有無與濃度有關,即使沒污染,事
09/26 23:02, 5F
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09/26 23:05, , 6F
實上都被污染了,只是有抗生素暫時抑制而已,所以可能不適合
09/26 23:05, 6F
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09/26 23:08, , 7F
用來實驗 若不加抗生素會更快污染? 還是其實其它人力干擾?
09/26 23:08, 7F
推
09/27 00:44, , 8F
看抗生素的種類和量囉...抗生素也是會消耗的~
09/27 00:44, 8F
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09/27 00:45, , 9F
器皿/medium或操作汙染還有機會避免..最怕是stock有問題~
09/27 00:45, 9F
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09/27 01:22, , 10F
謝謝板友的說明 我是有加一倍 stre./pen.
09/27 01:22, 10F
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09/27 03:55, , 11F
如果勤換培養液 真能讓抗生素"暫時"壓住細胞污染 有何不可?
09/27 03:55, 11F
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09/27 03:57, , 12F
現在作細胞的八成都沒在測黴漿菌了 大多只在乎看的到的污
09/27 03:57, 12F
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09/27 09:38, , 13F
你確定"有何不可"？ 像這樣硬撐的,實驗都很不順,像是不好
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09/27 09:41, , 14F
transfection或藥物處理反應不佳,最後得去要好的細胞重養
09/27 09:41, 14F
推
09/27 10:03, , 15F
硬撐的再現性會不好吧...砍掉重練最快
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09/27 11:25, , 16F
那要看實驗的等級吧 難道你有在測黴將菌嗎?
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09/27 11:25, , 17F
我只聽說過一個中研院的老師有在測黴漿菌
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09/27 11:26, , 18F
世界上絕大部分實驗室不都看不到等於沒事
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09/27 11:28, , 19F
事實上要監測黴漿菌的話 大部分實驗室都經營不下去了
09/27 11:28, 19F
推
09/27 11:30, , 20F
不推MZ 其實有很多PAPER會要求你做檢測
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09/27 11:31, , 21F
我不是說建議硬撐 污染我也只能砍掉
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09/27 11:32, , 22F
我覺得只是等級之差而已
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09/27 11:32, , 23F
任何黴漿菌測試都有漏網之魚 也無法保證百分之百
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09/27 11:33, , 24F
但是普通小實驗室這樣搞根本沒經費實力去這樣搞
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09/27 11:33, , 25F
如果你有經費時間去那樣搞 好確保你的data當然拍拍手
09/27 11:33, 25F
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09/27 11:33, , 26F
黴漿菌可以在做cell bnak的時候檢測一下
09/27 11:33, 26F
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09/27 11:34, , 27F
至少要源頭確保沒事
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09/27 11:34, , 28F
如果只有一年一百萬 難道還去測黴漿菌 測到就整批丟?
09/27 11:34, 28F
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09/27 11:35, , 29F
用壓制的方式其實很危險 因為細胞可能已經出問題了
09/27 11:35, 29F
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09/27 11:35, , 30F
做出來的DATA可信度會變差
09/27 11:35, 30F
推
09/27 12:16, , 31F
找不到原因 那就砍掉重練...
09/27 12:16, 31F
推
09/27 12:22, , 32F
transfection一搞出來不是就要做保存一些了嘛..
09/27 12:22, 32F
推
09/27 21:40, , 33F
不加比較好 有汙染馬上就會發現 避免汙染擴大
09/27 21:40, 33F
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09/27 21:41, , 34F
抗生素只是暫時壓抑細菌生長 終有一天得到抗藥性就會爆發
09/27 21:41, 34F
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09/27 21:45, , 35F
除非是養短期的 加無所謂 maintain的最好不加 確保真的乾淨
09/27 21:45, 35F
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09/28 17:57, , 36F
現在有可以解決黴漿菌污染的抑黴劑 效果不錯 但不便宜
09/28 17:57, 36F
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09/28 17:58, , 37F
我用的是跟康寧買的 確實救了我的細胞
09/28 17:58, 37F
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09/28 17:59, , 38F
黴漿菌污染肉眼無法觀測 細胞也不一定死 但可能影響實驗
09/28 17:59, 38F
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09/28 22:28, , 39F
我們也是有在檢測mycoplasma,如果真的細菌污染2X或是4X
09/28 22:28, 39F
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09/28 22:29, , 40F
PS加在medium裡面大約3-4天 換成沒有PS的medium
09/28 22:29, 40F
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09/28 22:30, , 41F
如果之後都沒污染 應該就比較沒問題了! 有錢還是找ATCC
09/28 22:30, 41F
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09/28 22:31, , 42F
殺mycoplasma樓上說的那個雖然貴,但效果好又方便
09/28 22:31, 42F
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