[方法] 免疫染色抗體可用稀釋倍率範圍?
大家好
敝人在做免疫染色時
用的是 Santa Cruz 的抗體
Santa Cruz 說明書上說
這支抗體在免疫染色可用的稀釋範圍
是 1:50 - 1:500
而建議起始稀釋由 1:50 開始測試
於是我遵照說明書的去做
測試結果似乎是不錯而且有染到目標物(神經細胞核)
但因為 1:50 實在太耗抗體
而且有 paper 作者告訴我說
他用同一支貨號抗體,1:1000 稀釋也染出來
於是老闆就叫我用同一批組織
下次測試 1:250 和 1:1000 的結果
如果較高稀釋倍率可以做出同樣水準結果的話,以後就可以這樣做
然後他要我告訴他,免疫染色定量
該用什麼方法判別 1:50 、 1:250 、 1:1000 之間染出來效果的差異
我想得到的只有去數細胞核數目
還有計算特定區域面積下的細胞核密度
請問有沒有這方面的前輩可以告訴我貴實驗室用的方法
或是介紹一些連結我可以參考的
還是就真的只是這兩種?
我老闆強調要 scientific ,不過我覺得不懂他 scientific 的標準在哪
如果他早就知道這種定量的方法,就不會要我去找給他了
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