[方法] slow-down PCR添加物

看板Biotech作者 (SNIKER)時間15年前 (2010/09/01 11:16), 編輯推噓2(2推 0噓 2→)
留言4則, 3人參與, 最新討論串1/1
我想要請問各位分生操作的高手 在做high GC content的PCR時 會採用的slow down PCR技術 添加的 dc7GTP 功能是避免GC過高的片段形成二級結構, hairpin... 那 dc7GTP對後續實驗通常會不會有甚麼影響性 有影響的話大概是怎麼影響 以及怎麼去除 and 如果實驗室沒有dc7GTP 按照protocol上建議可以添加glycerol DMSO 那甘油的作用大概是甚麼阿@@ 會不會影響到後續實驗 DMSO呢 會不會影響到後續實驗 以及甘油跟DMSO有建議的濃度或量嗎 甘油實驗室幾乎都有又便宜 可否以後做slow down都添加甘油就好了不要另外買dc7GTP 謝拉謝拉要靠各位高手幫忙解答了!!!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.74.156
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09/01 12:50, , 1F
DMSO會增加mutation機率，建議用betaine
09/01 12:50, 1F
推
09/02 10:18, , 2F
我做過85%以上的high GC, 加1%DMSO 25 cycle 勉強挑個
09/02 10:18, 2F
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09/02 10:18, , 3F
3-5clones 就會有全對的了!不用slow down PCR
09/02 10:18, 3F
推
09/04 03:25, , 4F
難搞一點的 3%-5%DMSO可以試試看
09/04 03:25, 4F
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