[求救] DNA基因片段pcr無法擴增
各位好
我想要求救的問題是:
我進行一段DNA片段的PCR擴增
已經試了一段時間了 完全沒有辦法擴增出來
但是我對該基因進行 RT-PCR 擴增是沒有問題的
以相同的primer進行DNA的擴增卻無法擴增
更奇怪的是
我把該DNA片段 拆成兩段作PCR卻可以做出來
例如 該片段總長度為2000 bp
由1-1500 可以做出來 由1400-2000可以做出來
可是做1-2000卻不行
真的很奇怪
不知道各位先進有沒有什麼看法
請大家指教
我的pcr條件:
94 C 5 min
94 C 1.5 min }
60 C 1 min }
72 C 2.5 min } 40cycle
72 C 5 min
基本上以2k 的長度應該一定要可以才對
但是做不出來
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