Re: [求救] cleavage site跟transmembrane domain꘠…
※ 引述《championelmo (elmo軒)》之銘言：
: 我現在要選PCR的目標
: 全長385 aa 前端有 transmembrane domain和cleavage site
: cleavage site長度比較長 transmembrane domain也包在裡面了
: 一般好像都會把transmembrane domain去掉
: 我想請問cleavage site的功能作用是??
: 請大家給我個建議應該要切那個?
cleavage site包含transmembrane domain?
看主內容敘述很難明白你想著手的目的
但你的推文又說 要將PCR product做cloning
所以我猜你應該是要夾出某段DNA序列做cloning
如果是如我所推測
那麼應該要先設計前後兩端的primer利用PCR夾出target sequence
然後純化PCR product，再做TOPOIV ligation和transformation
最後才抽DNA
cleavage site通常是for enzyme辨識的位置
簡單來說
如果有一peptide是ABCDEFG，被enzyme切開來後會變成AB+CDEFG或AB+CD+EFG等等
被切開的位置和數量決定於DNA序列上有多少該enzyme可以辨識的位置
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