[求救] 細胞seeding在24 well都會集中在中間

看板Biotech作者 (.......................)時間15年前 (2010/05/04 21:47), 編輯推噓5(506)
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我將10公分盤的細胞trypsin下來後,拿去離心,屬細胞 用所要的medium量回沖細胞,也確實將細胞打散 但是load到24 well盤之後,用顯微鏡看都是非常集中在中間 用十字搖法反而更糟,也有照爬文所看來的輕拍四周,將細胞拍起來後靜置沉降 雖然是有將細胞拍起來,但是放入incubator數分鐘後用顯微鏡看還是集中在中間 由於我的細胞屬於比較不耐的,操作久了很容易狀況不好 這個問題已經困擾我很久了,請大家幫忙解惑 謝謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 221.169.119.105

05/04 22:41, , 1F
從24well開始用十字搖法就不太有用了,建議直接配那個濃度
05/04 22:41, 1F

05/04 22:43, , 2F
直接下,ex 每個well要有500ul,total 1x10^5的細胞數的話
05/04 22:43, 2F

05/04 22:44, , 3F
你就把你要種的濃度調到2x10^5/ml,然後直接500ul種進去
05/04 22:44, 3F

05/04 22:44, , 4F
全部種完在輕拍四周
05/04 22:44, 4F

05/05 10:12, , 5F
之前遇過同樣的事 算好細胞溶好Medium後 加到well不要搖
05/05 10:12, 5F

05/06 21:15, , 6F
我都邊看顯微鏡邊把細胞搖均勻~~
05/06 21:15, 6F

05/06 21:16, , 7F
十字法有時細胞反而更容易集中在中間~我都用畫圈圈搖
05/06 21:16, 7F

05/07 16:02, , 8F
同意B大的說法 在MEDIUM混好 加進去不要搖
05/07 16:02, 8F

05/10 01:14, , 9F
這個現象很有趣,叫"茶葉悖論"愛因斯坦的論文之一
05/10 01:14, 9F

05/10 01:15, , 10F
話說俺還為了這個跟中研院生醫所某PI吵起來了呢
05/10 01:15, 10F

05/10 01:18, , 11F
俺是resuspension後再操作台靜置1h等他貼後再移去培養
05/10 01:18, 11F
文章代碼(AID): #1Bu2MBo6 (Biotech)