[求救] 貼不同細胞數得到不同EC50(Proliferation assay) 合理嗎?
想請問板上的高手們
最近我在做細胞增生的實驗,
需要測得一個 growth factor 的EC50
一開始 我先貼不同的細胞數目
然後加入固定濃度的 growth factor
這個濃度是參考paper的EC50 然後再提高約10倍
然後在不同的時間點測細胞數目 (MTS assay)
用這個方法可以找到 貼約 50000 個細胞的 window 最大
接著 我貼三個濃度的細胞
分別是 35000, 50000, 75000 cells/well
然後加入不同濃度的 growth factor
奇怪的是 35000 cells/well 這組所得到的EC50 最低
其他兩組差不多大
另外 35000 cells/well 在高濃度的 growth factor下 已經可以達到飽和了
可是其他兩組卻完全沒有飽和的現象
請問這樣的現象是為什麼呢？
同一株細胞的EC50不是應該要一樣嗎?
為什麼會受到不同細胞數目影響?
懇請板上各位高手解惑了
謝謝
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