[求救] 測酵素活性時的buffer使用濃度

看板Biotech作者 (yae)時間14年前 (2010/04/14 19:20), 編輯推噓6(6推 0噓 4→)
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請問大家~在做酵素活性測試時會使用多少濃度的buffer呢? 我用50mM(total體積100ul)(這是參照paper的濃度) 老師覺得濃度不需要這麼濃~ 叫我用5~10mM就好 雖然buffer只是用來穩定反應環境的pH 但5mM會不會太稀了呢?(5mM是現在使用的濃度) 所以想問問大家使用的濃度是多少呢? 謝謝 -- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.121.200.192
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04/14 21:47, , 1F
感覺50mM太濃了
04/14 21:47, 1F
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04/15 08:51, , 2F
看你的酵素會不會受到離子濃度影響 還有酵素的sample本身
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04/15 08:53, , 3F
buffer濃度和pH值都是什麼狀況 酵素通常保存在 stable的
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04/15 08:54, , 4F
pH值環境 但是測活性的時候不一定會用同一個pH 如果不同
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的話濃一點也還好吧 我是配50mM溶受質在用
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04/15 19:29, , 6F
我的酵素是保存在pH7的20mMTris-HCl中，但用一樣濃度的Tris去
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OD值很不穩定，所以換了25mM MOPS+MES去測，值布會亂跳，但又
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覺得濃度會部會低的好像有加跟沒加依樣~
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04/15 19:36, , 9F
對了我說的25mM MOPS是stork
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推
04/17 20:13, , 10F
只要你的反應pH不會因為其他添加物而改變 buffer濃度就OK
04/17 20:13, 10F
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