[求救] lentivirus infection問題
最近在弄lentivirus knockdown實驗,有兩個問題想請問板上前輩:
1. 如果要做double knockdown,是否只要同時產生兩個病毒,再同時感染一盤細胞即可?
目前手上是只有lentivirus的系統,所以可能會考慮用同種的virus包裹不同的shRNA
,這樣行的通嗎? 還是必須要不同的virus system?
2. 我的系統來自於中研院的RNAi core,之前也想過把PGK-GFP的GFP切掉,換成我的基因
,但一直無法成功得到重組質體。利用限制酵素去切GFP,會多出一個比GFP還大一兩
百bp的亮帶,但是用RNAi core網站上給的PGK-GFP序列卻只會切出GFP。這樣是否表示
我的PGK-GFP有問題? 還是說真正的序列本來就跟網站上給的不一樣? 但是它真的會
表現GFP。 因為有搜尋到板上有前輩也曾經用過這個方法,不知道是不是也是用
pGKGFP這個載體呢?
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你是誰 我是山羌 沃!!!
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