[求救] 關於trypsin作用這樣對嗎？
我大概了解trypsin在繼代時的用途，
但是最近有位老師，
要我們把trypsin (不含EDTA) 0.05% 加入細胞 in HBSS
觀察30 min ~ 2hr
然後他認為這樣可以 block 細胞表面的蛋白質 (這是目的)
但是不會破壞細胞間的 tight junction
也不會剝離細胞
我們使用的是內皮細胞株 Caco2 ，
這種細胞在培養三週後會形成完整的tight junction
請問各位這樣的想法合理嗎？
因為不含 EDTA，tight junction 不會打開，所以不會影響細胞貼附和緊密性，
但 trypsin 仍然可以影響細胞表面蛋白
但是我認為
1. 在 HBSS 內，trypsin 應該就失去作用了
2. 即使有作用，在長時間處理下 (30min~ 2hr)
trypsin 除了分解細胞表面蛋白，也應該會分解 cadherin
造成 tight junction打開
(甚至使細胞脫離表面)
此外，我們得到的結果，似乎是會打開 tight junction
(但學妹覺得有可能是她實驗技術不純熟所致)
難道要調整 trypsin 濃度嗎
但是我覺得這樣的想法不太合理，想聽聽大家的意見，謝謝！
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