[求救] 關於in vivo的抗體封閉 抗體稀釋的比率
大家好
小弟之後想做的實驗是把一個protein的receptor給block掉
我們已經擁有那個receptor的antibody 是學姐遺留 ㄜ 不是 是存留下來的
效價還算蠻高的
因為沒有把抗體直接打進去體內過
所以有點不太清楚應該怎麼抓condition
比如做WB
有的抗體1:100 效價高的1:1000似乎都做得出來
但是in vivo 的實驗好像就算將抗體1:100稀釋都沒甚麼效果(聽說的)
所以不知道有沒有做過類似實驗的人可以為我解惑我應該怎麼抓condition
不稀釋(原抗體)
1:10 (with PBS)
1:20
1:50
1:100這樣幾組 合理嗎?
我們的protein會造成別的protein向上調控
所以我預備先抓condition
做個簡單的RT-PCR
看看被block掉的recepor加上原本的蛋白(ligand)後另一種蛋白的mRNA表達
(如果如預期的話 應該是後面的蛋白沒有明顯的被upregulate)
阿 說了那麼多
我的意思就是想請有做過in vivo的抗體blocking實驗的高手們
抗體應該都按甚麼樣的比率去做(大約的範圍)
畢竟學姐留下的抗體不多 很珍貴阿~ 打rabbit又是兩個月 很浪費時間的><
謝謝~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 220.191.114.194