[求救] 有關co-transfection

看板Biotech作者 (颶風之翼)時間14年前 (2010/03/18 19:53), 編輯推噓9(9推 0噓 13→)
留言22則, 7人參與, 最新討論串1/1
目前使用293FT這株細胞來生產lentivirus 請問在生產病毒的時候 是要用一般的293T medium還是含neomycin的293FT medium 因為不知道neomycin會不會對在co-transfection的細胞有影響 謝謝 -- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 211.76.175.171
推
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neomycin不等於G418
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另外，這時再加selective durg的用意在?
03/18 20:33, 2F
推
03/18 23:08, , 4F
G418是感染細胞後selection用的吧 做病毒加它沒有意義啊
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推
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293T Neo-resistant 加了 也沒差 哈哈
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293T是G418 resistant，不是Neo-resistant
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推
03/18 23:43, , 7F
生產病毒時不需要,但收集完後病毒去感染細胞後才需要G418
03/18 23:43, 7F
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Sorry 是我弄錯了 超低級的錯誤
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推
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我想原po並沒有弄錯，293FT這株細胞是專門用來產Lenti
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的細胞，Invitrogen的data sheet上的確建議培養是要加
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G418培養。可以維持293FT細胞產病毒的效率。有錯請指正。
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父上參考網址 http://0rz.tw/lxSII
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附
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推
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neomycin和geneticin是相似物 兩者都會被neo基因產物去活性
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推
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如果生產病毒的medium要加G418,那收集完後的sup裡還有多
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少G418?!被感染的細胞又還要在額外加多少G418才夠篩選?
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根本就無從定量起,所以生產病毒時是不加G418的
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推
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謝謝樓上的指正。harvest病毒的時候的確可以不加G418，
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但平常keep細胞的時候加G418是沒有問題的。
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感染細胞後使用的抗生素是視使用的vector而定，以我們
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為例，我們實驗室的系統是用puromycin進行篩選。
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無論如何，還是感謝您的糾正。
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