[求救] B16F10 in vivo metastasis

看板Biotech作者 (朝目標邁進)時間16年前 (2010/03/03 12:25), 編輯推噓0(004)
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目前實驗在做某基因knockdown會影響到B16F10的轉移能力 在in vitro transwell migration assay已經看到影響了migration能力 接下來進行in vivo metastasis assay 但try了兩批B6 mice都失敗 實驗過程如下 第一批 將B16F10 melanoma cell打下suspension於PBS中 以29G針頭經由tail vein注射 0.1 ml (2x10^5 cells) (六隻mice) 兩周之後犧牲一隻觀察lung沒有看到colony 剩下五隻三周後只有兩隻有看到colony但沒有paper多 第二批 步驟同第一批只將細胞數加到 3x10^5 目前兩周犧牲一隻lung沒有看到colony 跟學長姐討論過後 細胞數應該是夠的其他paper用2x10^5兩周就可以長很多colony 而且B16F10很常被用來做metastasis應該很容易長 可能最大的原因是29G針頭太小細胞會擠破... 請問有人做這方面的實驗嗎? 可以提供建議救救我 m==m -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.126.58.35

03/03 14:14, , 1F
我以前是用30G的針,細胞量相同,真的打進去一定會長
03/03 14:14, 1F

03/03 14:16, , 2F
也是打入後14天犧牲,取肺臟數黑色結節
03/03 14:16, 2F

03/03 14:22, , 3F
打進去的速度還蠻重要的,30MIN/10隻,太慢成功率越低
03/03 14:22, 3F

03/06 02:34, , 4F
建議妳確認一下細胞生長狀態 打動物的細胞狀態很重要
03/06 02:34, 4F
文章代碼(AID): #1BZUJ24q (Biotech)