[討論] 細胞繼代方式

看板Biotech作者 (歐~天呀)時間14年前 (2010/03/03 00:01), 編輯推噓8(8推 0噓 14→)
留言22則, 16人參與, 最新討論串1/1
版上各位前輩好 小弟想請教不同細胞株是否繼代方式也有所差異？ 在使用trypsin or edta 繼代前，是否先用PBS wash 洗去培養液中的血清 因為今天小弟的老闆突然說 在繼代前先用PBS潤洗過後，再加少量的trypsin去繼代的方式 PBS的使用對細胞傷害很大(使用的細胞株為Neuro 2A)....所以不可以用...="= 要用pipet吸乾75T的flask內的MEM...吸不乾淨在用pipetman伸進flask內吸... （重點是pipetman並非可整隻滅菌的...="=） 還說培養幹細胞株的絕對不會使用PBS的說詞 以上問題小弟誠心的請教有經驗的前輩，到底是老闆哪跟筋不對在找場子 或是真的是小弟該死學藝不精？？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 112.104.204.135
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＜－養幹細胞 PBS用爽爽
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老闆不准用PBS的話 就用trypsin潤洗吧XD
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重點是MEM怎麼吸都不會乾淨吧
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小弟覺得PBS對細胞傷害很大比較嚴重>"<
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猜測：neuron2A 貼的比較不緊 PBS下去先"沖掉"一半
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所以才會認為對細胞不好。基本上我碰過的幹細胞PBS都不會有害
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如果真是那樣 你直接用MEM沖 說不定都掉下來了 省trypsin XD
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培養幹細胞一樣會用PBS阿 ＝ ＝
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幹細胞是無辜的。XD
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不同細胞當然會有差 有的細胞甚至不能用trypsin
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不過有些原廠的 protocol 會建議跑該產品實驗前不使用PBS
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實驗室中有些貼不穩的癌細胞我們還是用 PBS 做潔淨沖洗
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只不過要沿著 dish 邊緣非長慢速的加入
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我們都會用PBS wash...應該還好吧= =
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ATCC上面是寫用0.25%trypsin去洗
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反正你只要能搞掉裡面的trypsin inhibitor就OK了
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ESC我們家一樣PBS用爽爽XD
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ESC要怎麼養比較不容易分化阿..?
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用愛去養它
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說真的 PBS會傷害細胞的說法我第一次聽過
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...原po說的是stem cell還是 cell line? 這兩者不同
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neuron 2A是cell line 吧...我自己養都會用PBS洗ㄟ ...
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