[求救] plasmid的conformation會從open circular變成supercoil嗎?
想請問大家一個問題,
小弟前一陣子用CsCl梯度離心分離出同一種plasmid的open circular form與supercoil
form (這2種conformation的plasmid是分開回收的)。
而剛開始做完純化的時候,我有先將分別回收的這2層plasmid跑電泳測試,一開始這2種
不同conformation的plasmid分的很清楚,但是後來我將open circular form的plasmid
重複解凍過2~3次後,再將open circular form的plasmid拿去跑電泳後,發現supercoil
form的plasmid變多了(原本幾乎全部都是open circular form)。
簡單的說,就是原本主要是open circular form的plasmid經過重複解凍後,感覺有部份
的plasmid變成了supercoil form。
想請問大家,這種情形是正常的嗎?
謝謝。
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推
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