[求救] plasmid的conformation會從open circular變成supercoil嗎?

看板Biotech作者 (歸蝶)時間16年前 (2010/02/20 01:19), 編輯推噓1(101)
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想請問大家一個問題, 小弟前一陣子用CsCl梯度離心分離出同一種plasmid的open circular form與supercoil form (這2種conformation的plasmid是分開回收的)。 而剛開始做完純化的時候,我有先將分別回收的這2層plasmid跑電泳測試,一開始這2種 不同conformation的plasmid分的很清楚,但是後來我將open circular form的plasmid 重複解凍過2~3次後,再將open circular form的plasmid拿去跑電泳後,發現supercoil form的plasmid變多了(原本幾乎全部都是open circular form)。 簡單的說,就是原本主要是open circular form的plasmid經過重複解凍後,感覺有部份 的plasmid變成了supercoil form。 想請問大家,這種情形是正常的嗎? 謝謝。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 111.255.41.243

02/20 13:08, , 1F
正常! open form 在4-16度會漸漸折疊成supercoil
02/20 13:08, 1F

02/23 00:22, , 2F
謝謝樓上!
02/23 00:22, 2F
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