[求救]請求好用的 mycroplasma PCR kit

看板Biotech作者 (陳抽筋)時間16年前 (2010/02/07 20:50), 編輯推噓5(5推 0噓 13→)
留言18則, 5人參與, 最新討論串1/1
大家好 最近因為在養細胞 但懷疑有 mycroplasma 的污染　 因此想用 PCR 的方式來偵測看看 在網路上找了一些 kit 發現有一些產品台灣以經沒有代理了 還有一組是sigma 的 但實驗室的機器不適用這家的 PCR tube 想請大家推薦驗實驗室使用的　PCR kit (廠牌） 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.167.189.75 ※ 編輯: gugin 來自: 218.167.189.75 (02/07 20:51)
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萬造的PAA mycotrace 口碑還不錯
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推
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進階代理的biological industries那組也很不錯
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推
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自己設計PRIMER比較省
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MYCO-F: 5'-gggAgCAAACAggATTAgATACCCT-3'
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MYCO-R: 5'-TgCACCATCTgTCACTCTgTTAACCTC-3'
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1ml medium低速離心去細胞，高速離心10分鐘去上清液
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看不到的pellet加50ul dd water, 100度5min就是template
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大約拿2-3ul作反應就行
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推
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kit會給positive control :)
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謝謝大家的幫忙 ^_^
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不過有一個小問題還是不清楚 如果把 supernatant 離心後
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再把medium去除 這樣會不會很容易把下面看不到的微小 pellet
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也吸起來 @@ 這樣會不會造成偽陰性
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推
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一隻mycoplasma就有上百個copy number,很難做不出來y
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最怕的是negative control,因為即使是滅菌水，若有MYCO.
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的屍體，一樣會被測出來
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哦 那我了解了 謝謝大家的幫忙 ^^
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