[求救] competent cell問題

看板Biotech作者 (打雜路人甲)時間16年前 (2009/12/28 19:36), 編輯推噓2(203)
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請教各位大大 我做competent cell(electroporation) 第一次電的時候,效率極差.10的5次方cfu 但是第二次出來的結果卻整整差了100倍~1000倍 這跟質體稀釋有關嗎? 我做的是BL21(DE3) 的菌 OD直方面測600=0.68(但是看到很多人都用0.3~0.6,實驗室protocol也寫0.6) 最後是以50ml 濃縮成400ul下去分裝 小弟弟一次做competent cell 比較有問題的都是上面幾點,其他都跟實驗室protocol一樣 想請教各位前輩,哪邊需要修改一下. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.40.85.239

12/28 20:32, , 1F
實驗室方法也是參考用 做實驗還是自己看分生實驗的聖經
12/28 20:32, 1F

12/28 20:35, , 2F
實驗室人來來去去的 那方法阿哉被亂改過了沒 參考聖經
12/28 20:35, 2F

12/29 16:03, , 3F
我們lab是調成0.45~0.5之間~~電的細胞要洗glycerol
12/29 16:03, 3F

12/29 16:03, , 4F
那個洗的過程一定要讓它冰涼暢快XD
12/29 16:03, 4F

01/01 15:41, , 5F
全程冰上比較好
01/01 15:41, 5F
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