[求救] SDS-PAGE跑很慢的原因?

看板Biotech作者 (elmo軒)時間14年前 (2009/12/13 00:10), 編輯推噓10(1009)
留言19則, 12人參與, 5年前最新討論串1/1
請問 關於跑SDS-PAGE的相關問題 我的膠片是8%(resolving gel) 5%(stacking gel) 最近跑了很多次 每次都要跑3個多小時 請問固定電壓100V 這樣時間正常嗎? 有什麼原因會影響電泳速度? 問過別的實驗室的學長姐 她們大多跑1個多小時 我也有去借用他們的 但還是跑很久 我有想過可能是power supply的問題 最主要還是想要知道正常的情況電泳是跑多久?是固定電壓在多少呢? 謝謝各位前輩~~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.124.65.142

12/13 00:18, , 1F
可能是running buffer的濃度不對 太稀的話會變慢
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12/13 00:18, , 2F
恩 那很有可能buffer吧~ 重配看看囉
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12/13 00:24, , 3F
天氣冷會跑比較慢(離題拖走)... 另我下膠8%,80V會跑2-3hr
12/13 00:24, 3F

12/13 00:56, , 4F
你中間的buffer有沒有加得滿滿的阿~通電後應該會有很多泡泡
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12/13 01:33, , 5F
Buffer有漏也會變慢
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12/13 02:05, , 6F
buffer濃度越稀會越跑越慢~~~固定安培數會跑得比較穩定
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12/13 11:12, , 7F
直接開160V跑,一下就跑完了
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12/13 16:16, , 8F
我是先配10X的buffer 使用前在稀釋成1X 請問這樣太?
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12/13 21:32, , 9F
我用最高嗎?我都用 180V 耶~ 12% 跑50分鐘左右就跑完了
12/13 21:32, 9F

12/13 22:01, , 10F
借power supply用你的buffer 以及用別的實驗室的buffer
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12/13 22:01, , 11F
用你自己power supply看時間哪一個有差 先分析原因
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12/14 21:24, , 12F
強者ad1980
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12/14 23:38, , 13F
會因為電壓很高產生熱 而使膠片解析度降低嗎?
12/14 23:38, 13F

12/15 19:31, , 14F
曾經有一次沒注意跑成300V...解析度還好
12/15 19:31, 14F

12/15 19:32, , 15F
膠變得很脆弱是真的
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12/18 13:09, , 16F
我之前待的實驗室大家都跑180V阿~ 所以我都跑180V,教人也
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12/18 13:10, , 17F
都教跑180V,現在才知道原來大家都沒跑那麼高.....
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11/11 01:53, , 18F
我之前待的實驗室大家都 https://muxiv.com
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01/03 17:04, 5年前 , 19F
我用最高嗎?我都用 1 https://daxiv.com
01/03 17:04, 19F
文章代碼(AID): #1B8y1Rez (Biotech)