[求救] 請教細胞分離及flow cytometry的問題

看板Biotech作者 (JUNE)時間14年前 (2009/12/06 19:18), 編輯推噓2(204)
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是這樣, 以前我用MACS的系統分離CD34細胞 跑流式細胞儀分析都沒有問題, 不過最近 換了STEMCELL牌子的分離系統, 跑流式細 胞儀卻發生染CD34抗體的細胞, 他的螢光 強度比ISOTYPE還要小(左移), 把兩個檔案 OVERLAY以後, 兩個波呈現完全分離的情況 不過不太確定到底是分離系統出了問題, 還是跑FLOW的問題, FLOW的抗體和之前用 的是相同的, 想知道什麼情況下, SAMPLE 的螢光強度, 會比ISOTYPE微弱那麼多, 希 望有相似經驗的板友能提供可能解答, 感激 不盡! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.130.189.48

12/06 19:25, , 1F
分離用和FLOW用的抗體, 兩個CLONE不同
12/06 19:25, 1F

12/11 17:07, , 2F
PMT的voltage前後是否一樣
12/11 17:07, 2F

12/11 17:11, , 3F
上樣前是否有PRIME(趕氣泡) 注意是否是因氣泡導致的shift
12/11 17:11, 3F

12/11 17:15, , 4F
抗體不同牌?就幾乎一定不一樣! 或者是你anti-CD34的isotype
12/11 17:15, 4F

12/11 17:17, , 5F
跟你當control的isotype不同 例如IgG1跟IgG2就會不一樣
12/11 17:17, 5F

12/11 17:18, , 6F
Mouse的IgG1跟Rat的IgG1也不一樣...等等。 (淺見請參考!)
12/11 17:18, 6F
文章代碼(AID): #1B6vB_c8 (Biotech)