[求救] 如何移除溶液中的TCA

看板Biotech作者 (等待)時間16年前 (2009/11/21 17:51), 編輯推噓2(2推 0噓 11→)
留言13則, 6人參與, 7年前最新討論串1/1
*[m *[33mctrl 發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 因為我的蛋白質太稀，所以做了10%TCA沉澱後跑膠， 銀染後還是看不到BAND， 結果發現我的蛋白質似乎在TCA沉澱(5~20%)的上清液中， 想請問我該怎麼做才能去除溶液中的TCA呢? 原本想藉著透析去TCA的， 但是我的buffer含有EDTA和Tris， 不知道會不會和TCA反應? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.24.253.19
推
11/21 21:38, , 1F
啊就不要做TCA沈澱不行嗎？離心濃縮,氮氣吹乾,冷凍乾燥...
11/21 21:38, 1F
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11/21 21:39, , 2F
都可以除去水份，TCA超難回溶的…
11/21 21:39, 2F
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11/21 21:40, , 3F
用透析小心越透越稀…
11/21 21:40, 3F
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11/21 23:34, , 4F
蛋白質沒有沉澱? 離心有發現沉澱物嗎
11/21 23:34, 4F
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11/21 23:37, , 5F
如果只是太稀 建議離心濃縮 有些蛋白置換溶液仍引發沉澱
11/21 23:37, 5F
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11/22 11:53, , 6F
有EDTA跟Tris 還是可以用TCA沉澱
11/22 11:53, 6F
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11/22 11:55, , 7F
不過TCA沉澱會讓你的樣品損失很多 特別蛋白質濃度低的時候
11/22 11:55, 7F
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11/22 11:56, , 8F
比較建議用 missoul 說的方式 或是用濃縮管
11/22 11:56, 8F
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11/22 11:58, , 9F
冷凍乾燥或是抽真空 都可以試試
11/22 11:58, 9F
推
11/22 23:09, , 10F
可以用acetone沈澱，比較好回溶
11/22 23:09, 10F
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11/22 23:40, , 11F
謝謝大家的建議，我現在等離心濃縮管到貨再試試吧^^
11/22 23:40, 11F
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11/11 01:51, , 12F
謝謝大家的建議，我現在 https://daxiv.com
11/11 01:51, 12F
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01/03 17:03, 7年前 , 13F
用透析小心越透越稀… https://daxiv.com
01/03 17:03, 13F
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