[求救] Western

看板Biotech作者 (我)時間16年前 (2009/10/23 16:12), 編輯推噓1(1012)
留言13則, 5人參與, 7年前最新討論串1/1
想求救一下 現在在壓 transferrin 這隻protein 用的是abcam的ab8598的一抗 然後每次壓幾乎都呈現 http://www.wretch.cc/album/show.php?i=DuoYui&b=8&f=1780745029&p=0 但是beta-actin卻又壓得出來 想請問一下有甚麼可能的原因?? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.10

10/23 17:55, , 1F
Background很高 先確定你一抗二抗dilution濃度,wash沒有問題
10/23 17:55, 1F

10/23 17:56, , 2F
降低background後,可以的話拿個positive sample一起跑看看
10/23 17:56, 2F

10/23 17:57, , 3F
還是沒有band的話 就可以去客訴了
10/23 17:57, 3F

10/23 18:09, , 4F
所以就是在上完二抗後 洗多次一點 是嗎?
10/23 18:09, 4F

10/23 18:10, , 5F
照理來說 我的postive control 應該已經在上面了...
10/23 18:10, 5F

10/23 22:14, , 6F
不少人建議我洗乾淨跟一抗著手 我明天會試試看的
10/23 22:14, 6F

10/23 22:17, , 7F
希望明天不會又發文求救 囧"
10/23 22:17, 7F

10/26 10:39, , 8F
這根本沒有訊號只有background 提高訊號有三種方法
10/26 10:39, 8F

10/26 10:40, , 9F
增加loading蛋白量 增加一抗濃度(二抗別動) 用enhanced ECL
10/26 10:40, 9F

10/26 10:41, , 10F
提高一抗濃度 二抗結束wash就多次一點
10/26 10:41, 10F

10/27 22:44, , 11F
其實 我看不太懂你要的band是上下中間哪個...
10/27 22:44, 11F

11/11 01:48, , 12F
還是沒有band的話 https://muxiv.com
11/11 01:48, 12F

01/03 17:02, 7年前 , 13F
這根本沒有訊號只有ba https://noxiv.com
01/03 17:02, 13F
文章代碼(AID): #1AuMLTiN (Biotech)