[求救] DNA ladder!!!
小弟參考版上Seal13的protocol (5456篇)
如下...
1. 1 x 10^6 cell 以trypsin 處理後離心
2. 以PBS wash x2
3. add 1 ml lysis buffer 插冰上45min
4. add 1ml phenol/chloroform ,離心
5. 取上清液加入同體積chloroform ,離心
6. 取上清液,加入兩倍體積100% EtOH, 1/10體積NaoAc
7. 置-70度一小時以上
8. 離心,70% EtOH wash ,離心 ,去除酒精
9. air dry
10. add 100 入 回溶
11. 跑2% agarose
_____________________________________________________
細胞是MCF-7
跑出來後在幾 kbp處有兩條band(有人知道這是啥嗎？ 跑好多次了都看到他們倆)
以下都糊糊的....= =
之後也參考版上的文章以H2O2為positive control
濃度分別做了 2mM , 1mM ,0.5mM
作用時間6小時
也沒有看到DNA ladder
實驗室有人說因為H2O2可能沒有活性了(實驗室那罐是95年的)
叫我買一罐新的做做看（有那麼快失活嗎？？）
想請問有人做過嗎
怎麼做都做不出來真的不知道原因在哪很痛苦
另外除了H2O2
有沒有其他不要太貴的positive control可以用？？
感謝您的耐心與愛心^^
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 124.11.66.174
→
10/18 18:57, , 1F
10/18 18:57, 1F
→
10/18 23:53, , 2F
10/18 23:53, 2F
推
10/19 10:15, , 3F
10/19 10:15, 3F