[求救] X-gal的染色都無法染上細胞

看板Biotech作者 (陳小文)時間16年前 (2009/10/11 19:46), 編輯推噓0(0推 0噓 2→)
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首先先提供X-gal的配法 依照 http://www.ihcworld.com/_protocols/special_stains/x_gal.htm 配置 先前染色都可以，最近兩個星期怎麼配置都無法成功染色 所有藥品都有重新確認過，也重新配置過 Potassium Ferricyanide Crystalline Potassium Ferricyanide Trihydrate Magnesium Chloride 都有注意，都沒有受潮 X-gal 儲存在-20C ， DMF 也是新的 cytospin打完後，用0.5%glutaraldehyde固定5min 再用PBS wash 三次，浸泡X-gal 37C 避光 overnight 隔天 PBS wash 三次，ddH2O wash 三次，99.5% EtOH 一次 顯微鏡看玻片，一點點藍藍的都沒有……… 之前只要有染上，不用顯微鏡也看得到藍藍的，現在都沒有染上 麻煩請有作過相同實驗的先進，幫忙看看問題出在哪邊，謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.64.23.20
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10/11 20:50, , 1F
x-gal是fresh prepared嗎? 如果不是,可能要考慮保存條件
10/11 20:50, 1F
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10/11 20:53, , 2F
就是會不好看或是沒有,所以都是現配
10/11 20:53, 2F
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