[求救] Western blot的band會斷裂
先附上圖,http://www.flickr.com/photos/8163301@N06/3884552424/
我是用BioRad的濕式mini-transfer系統,
電流是350-400mA,一個半小時,band的位置大概是34kDa,
令我納悶的是band斷裂(圈起來的地方)的情形不是每次都有(比例算高的),
這是因為有氣泡的關係嗎?
壓完片的membrane用CBR染色的確有些部分band都消失或扭曲了,
可是我已經將membrane和gel間的氣泡都趕走了,
海綿和濾紙那邊的氣泡說真的也看不出來,
另外常常在transfer完後,membrane會變的有點透明(有蛋白質軌跡的地方),
這樣正常嗎?是不是membrane該換了呢?
麻煩高手解答一下,謝謝
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