[求救] Western blot的band會斷裂

看板Biotech作者 (嘿嘿)時間16年前 (2009/09/03 22:58), 編輯推噓0(004)
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先附上圖,http://www.flickr.com/photos/8163301@N06/3884552424/ 我是用BioRad的濕式mini-transfer系統, 電流是350-400mA,一個半小時,band的位置大概是34kDa, 令我納悶的是band斷裂(圈起來的地方)的情形不是每次都有(比例算高的), 這是因為有氣泡的關係嗎? 壓完片的membrane用CBR染色的確有些部分band都消失或扭曲了, 可是我已經將membrane和gel間的氣泡都趕走了, 海綿和濾紙那邊的氣泡說真的也看不出來, 另外常常在transfer完後,membrane會變的有點透明(有蛋白質軌跡的地方), 這樣正常嗎?是不是membrane該換了呢? 麻煩高手解答一下,謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.165.129.144

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改成一片100mA,4度C,overnight;或是200mA,4度C,2hr~2.5hr
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同樣的跑兩片的話,就把電流double
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所以這是因為溫度太高的關係?兩片電流需要加倍嗎?看來是
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串聯啊
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